Гистология и игх в чем разница

Иммуногистохимическое исследование (ИГХ)

Иммуногистохимия является дополнительным методом исследования, применяемым в патологической анатомии при диагностике доброкачественных и злокачественных новообразований, когда постановка диагноза по гистологическим препаратам не представляется возможной или требуется уточнение клинически важных молекулярных параметров опухоли.

Данная методика основана на выявлении в анализируемом образце ткани белков, специфичных для того или иного вида клеток, что позволяет отличать один вид опухоли от другого, а также выявлять маркеры, отвечающие за лекарственную чувствительность опухолевой ткани.

Зачем нужна иммуногистохимия, если уже сделано гистологическое исследование?

В ряде случаев проведения обычного гистологического исследования биопсии бывает недостаточно, что объясняется следующими причинами:

Например, диагноз практически всех лимфом и лейкозов (более 70 видов!) ставится после ИГХ исследования, а в части случаев дополнительно требуется молекулярно-генетическое исследование; в свою очередь, за гистологическим диагнозом «мелкокруглоклеточная опухоль» может скрываться до 13 различных злокачественных опухолей, каждая из которых имеет свой прогноз и требует индивидуального плана химиолучевого лечения – единственным методом, способным помочь врачу в дифференцировании этой группы опухолей, является ИГХ исследование.

Сроки выполнения ИГХ исследования

В соответствии с п.24 Приказа №179н от 24.03.2016 г. Минздрава России, срок выполнения ИГХ исследования:

Источник

Гистологическое исследование опухолей

Точная постановка диагноза «рак» невозможна без проведения гистологического анализа.

Гистологическое исследование опухолей является одним из самых достоверных и важных диагностических методов. Гистологическое исследование проводят врачи-патоморфологи, оценивая под микроскопом материал после биопсии (непосредственно фрагмент опухоли) или же операционный материал (удаленный орган или его часть). В дальнейшем при необходимости используются дополнительные методы исследования (иммуногистохимия (ИГХ) и молекулярные исследования).

Данное исследование проводится как для выяснения происхождения опухоли, так и для определения стратегии будущего лечения. Вероятность назначения неправильного лечения велика при отсутствии информации о том, что из себя представляет обнаруженная опухоль. Нельзя ориентироваться лишь на клиническую картину, результаты методов визуализации (рентген, КТ, МРТ) или анализов крови. Зачастую онколог не знает, с чем имеет дело, и может лишь высказать свои предположения, поставив диагноз со знаком «?». Тогда и назначается биопсия с последующим морфологическим исследованием.

Морфологическое исследование является заключительным этапом в диагностическом поиске и позволяет онкологам безошибочно выбирать между тем или иным курсом химиотерапии, или же совсем от нее отказаться в случае получения заключения о доброкачественном процессе.

Кроме 100% точности диагноза, в отдельных случаях гистологическое исследование позволяет расширить, или же наоборот, ограничить объем хирургического вмешательства. Приведем несколько примеров.

Опухоль молочной железы. Первая мысль, которая возникает у женщины – рак! Да, это возможно, но… Существует ряд оговорок. После какого метода исследования был выставлен диагноз? Если это цитологическое исследование (мазки), то есть высокая вероятность ошибочно выставленного диагноза. Это обусловлено тем, что даже «нормальные» клетки эпителия после нанесения на стекло (грубо говоря «размазывания») могут принимать атипичный вид и вводить цитолога в заблуждение. В таком случае просто необходимо гистологическое или иммуногистохимическое (ИГХ) исследование биоптата («кусочка опухоли») врачом-патологоанатомом, который достоверно выставит диагноз. Ведь вероятность того, что опухоль доброкачественная, также есть. В таком случае удалять всю молочную железу и калечить пациентку нет необходимости, а можно ограничиться лишь секторальной резекцией (удалить лишь пораженную часть железы). Или же в случае получения диагноза «лимфома» (такое тоже возможно), вообще не проводить оперативного вмешательства.

Поражение желудка. Опять же, есть вероятность того, что это рак. Но также не исключена и лимфома. В ее случае нет необходимости удалять желудок, а можно ограничиться лишь химиотерапией.

Все зависит, конечно, от качества материала, взятого для исследования и квалификации патоморфолога. Ни один диагноз опухоли, злокачественной или доброкачественной, не выставляется лишь одним врачом. В таких случаях принцип коллегиального просмотра очень важен. Минимум два мнения и четыре глаза. Ведь то, что видит один врач, может пропустить другой или не обратить на это внимания.

Подводя резюме под вышесказанным, можно выделить несколько последовательных этапов до момента постановки правильного диагноза:

— обращение пациента к клиническому врачу/онкологу;

— полное и всестороннее обследование с выявлением опухолевого очага;

— биопсия/удаление образования с его доставкой в лабораторию патоморфологии для морфологической диагностики;

— вместе с материалом предоставляются как можно более полные клинические данные и результаты методов обследования.

Как уже было сказано выше, финальной точкой в диагностическом поиске для клинических врачей является заключение патоморфолога.

Стоимость и срок исследования

* Организация и оплата доставки сырого материала (не в блоках) осуществляется клиентом.

По всем возникшим вопросам Вы можете проконсультироваться у нашего медицинского администратора по телефону: 8-800-555-92-67 или написать нам в WhatsApp: +7 925 740 05 87

Источник

Методы анализа опухолей – гистология и иммуногистохимия

Очень много вопросов мне задают больные и их родственники относительно такой, казалось бы, простой, вещи – как гистологическое исследование (гистология) и иммуногистохимическое исследование (иммуногистохимия, ИГХ).

Ответить на некоторые их этих вопросов – и есть цель этой статьи. Прошу моих более искушенных читателей извинить меня за некоторые упрощения, допущенные при написании данного материала, мое желание при этом было одно – обеспечить максимальную доступность текста широкому кругу непосвященных людей.

Что же такое гистология и иммуногистохимия

Гистологическое исследование — исследование любой ткани, которая была взята в процессе (как правило) биопсии у человека. Гистологическое исследование, наряду с иммуногистохимическим исследованием — самое важное исследование в диагностике новообразования пациента и крайне необходимо для назначения дальнейшего лечения.

Без гистологического анализа (или без иммуногистохимического анализа) патологической ткани однозначно поставить пациенту диагноз – злокачественное новообразование – невозможно, несмотря на имеющиеся у врача-онколога данные различных иных анализов и исследований.

Методы анализа опухолей – гистология и иммуногистохимия
Гистологическое исследование выполняет специальный врач – специалист по патоморфологии, ткань исследуется с помощью микроскопа. Исследованию подвергается биопсийный, либо, непосредственно, операционный материал.Само исследование может быть срочным – обычно такое происходит, когда пациента оперируют, даже и по другому поводу, и занимает минут 30 (с последующим обязательным пересмотром) и плановое — до 10 дней.

Точность гистологического исследования сильно зависит от того, насколько качественно взят материал, как качественно работает сама лаборатория, насколько высока квалификация врача, проводящего это исследование.Именно поэтому бывает так, что при пересмотре гистологии результаты отличаются. Поэтому пересматривать препараты можно, а иногда и просто необходимо.

Что же такое — биопсия

Биопсия (от латинского «био» — жизнь и «опсия» — смотрю) — это взятие (из живого организма) тканей для дальнейшего их микроскопического исследования после окраски специальными красителями. Биопсия при большинстве онкологических заболеваний — обязательный метод исследования для постановки диагноза.

Биопсийный материал берется разными способами – с помощью специальной иглы, отщипыванием кусочка ткани, исследуются промывочные воды и т.п.Само взятие биопсийного материала, как правило, безболезненно. Неприятен, зачастую, процесс взятия – это сопряжено с трудностями доступа к некоторым новообразованиям.

В ряде случаев, в процессе биопсии применим наркоз, во многих случаях биопсия делается под инструментальным (например — УЗИ) контролем. Бывает, что сразу требуется и удаление имеющегося новообразования и биопсия сразу – и исследование и лечение (скажем, при удалении полипа с целью исследования таким образом происходит и излечение).

Иммуногистохимический анализ

Иммуногистохимия (ИГХ) – метод идентификации специфичных антигенных свойств злокачественных новообразований.

Иммуногистохимическое исследование – отличная и достаточно современная методика дифференциальной диагностики злокачественных новообразований. ИГХ позволит исследователю определить гистогенез опухоли на клеточном уровне.

Иммуногистохимия позволит оценить темп роста клеток опухоли, прогноз, реакция на химиотерапию, возможность гормонального лечения, ответ опухоли на так нызываемые таргетные препараты.

С помощью ИГХ определяют:

• наличие рецепторов стероидных гормонов (прогестерона и эстрогена при РМЖ);

• экспрессию HER-2/neu в клетках при РМЖ;

• производится иммунодиагностика лимфопролиферативных процессов (определяются ходжкинские и неходжкинские лимфомы);

• гистогенетическую принадлежность метастатических опухолей (когда первичный очаг новообразования не определен);

• гистогенетическую принадлежность неклассифицируемых опухолей.

Для ИГХ возможно использовать с всежие срезы,и приготовленные из парафиновых блоков много лет назад.При ИГХ исследовании недифференцированных опухолей удается установить их тканевую или даже органную принадлежность, это позволит подтвердить или опровергнуть метастатический характер исследуемой опухоли новообразования и выявить первичную опухоль.

Несмотря на то, что ИГХ более информативна, чем гистология, в ряде случаев необходимо именно гистологическое исследование. Так, например, иммуногистохимия не поможет отличить меланому от невуса, так как они будут окрашиваться одинаково, зато с этой задачей прекрасно справится гистологический анализ.

Пример гистологии рака груди

Иследовано 15 фрагментов ткани молочной железы:

Пример иммуногистохимии рака груди

А вот результат иммуногистохимии этого же новообразования в груди. Строма с выраженным склерозом, местами с диффузной лимфоидных фолликулов.5 фрагментов – ткань молочной железы с аденозом. По данному материалу стадирование онкопроцесса не представляется возможным.

Обобщенно, ИГХ дает нам следующее –Герцепт — статус — отрицательный, т.е. лечение Герцептином не показано.Выявлена чувствительность опухоли к эстрогену и прогестерону, что дает возможность назначить тамоксифен или ингибиторы ароматазы.Инвазивный компонент указывается в баллах. В данном случае 5б — на границе с низкой и средней степенью злокачественности.Показатель G указывает на степень дифференцированности опухолевых клеток. В данном случае G2 — средняя степень.

Ki-67- говоря по простому, показывает, насколько агрессивен рост опухоли. До 15% — низкоагрессивная, 30% и более — высокоагрессивная.Иными словами, данное новообразование возможно лечить гормональными препаратами и химиотерапией, но оно не поддается лечению Трастузумабом.При таком раскладе, прогноз, в общем, благоприятный.Таким образом – гистологическое исследование и иммуногистохимическое исследование являются высокоинформативными и крайне необходимыми при подозрении на наличие злокачественного новообразования, отказываться от проведения данного исследования нельзя.

Источник

Гистология и игх в чем разница

После того, как выбран метод забора материала от пациента (биопсия, оперативное вмешательство в объеме удаления органа), все выделенные фрагменты должны быть как можно быстрее доставлены в лабораторию патоморфологии. Скорость необходима для того, чтобы приблизить пациента к получению диагноза и незамедлительно начать проведение того или иного терапевтического курса. Ведь существует ряд опухолей (например, некоторые лимфомы), при которых счет идет на дни, а иногда на часы.

Весь материал необходимо погрузить в забуференный 10% формалин в соотношении 1:10 (одна часть материала к 10 частям формалина). Это позволяет непосредственно после операции начать фиксацию тканей, предотвратить их распад и, соответственно, сохранить все структуры материала в неизменном виде до момента просмотра патоморфологом.

Следует знать, что каждый отдельно выделенный фрагмент должен быть помещен в отдельный контейнер с маркировкой. Например, нефрэктомия (удаление почки) с резекцией (иссечением) диафрагмы и выделением регионарных лимфатических узлов. Отдельно помещается почка, отдельно – резецированная часть диафрагмы, отдельно – лимфатические узлы. Или: лимфатические узлы брюшной полости, образование средостения, шейные лимфатические узлы. Недопустимо «смешивать» материал в одном контейнере.

После фиксации, которая занимает от нескольких часов до, что редко, суток, материал отправляется в проводку. На этом этапе он проходит через различные спирты или специализированные растворы, что позволяет подготовить его к работе (обезжирить и дополнительно фиксировать). Существует несколько способов проводки материала. Основные – вакуумная проводка и экспресс. Экспресс проводка длится от 1,5 до 3-х часов, пригодна для любого вида материала и позволяет в наиболее краткие сроки получить готовый к работе образец. Вакуумная проводка длится до 12 часов, позволяет подготовить различные типы тканей, в том числе и наименее фиксированные, а также позволяет «загружать» материал на выходные и получать его в готовом виде в понедельник, что экономит время.

После проводки все образцы заливают в парафин в специальные формы (гистологические кассеты, парафиновые блоки), в которых они застывают. Здесь (в парафине) весь материал хранится вечно.

После заливки в парафин материал поступает в кабинет к лаборантам, где и происходит один из самых важных этапов работы – приготовление гистологических препаратов. На специальных аппаратах – микротомах – лаборант делает срезы с парафиновых блоков толщиной до 1,0мкм и укладывает их на специальные гистологические стекла.

Недаром здесь употреблены слова «важный этап». На сегодняшний момент невозможно представить ни одну лабораторию без хороших лаборантов, на 100% профессионально владеющих своими навыками. Без их полной самоотдачи весь последующий этап (а именно работа врача) сводится на нет. От хорошо приготовленного препарата зачастую зависит половина успеха в постановке диагноза. И это не просто слова. Очень важно получить срез нужной толщины, где клетки лежат в один слой, а не накладываются друг на друга в несколько слоев, создавая ошибочную гиперклеточную картину. Важно видеть весь срез полностью, а не «расплывшийся» или срезанный наполовину или «в складку». Все эти моменты значительно затрудняют процесс диагностики и требуют повторного приготовления препаратов необходимого качества, что так же оттягивает момент постановки диагноза.

После укладывания срезов на стекло (с одного блока один срез на одно стекло) препараты проходят этап рутинной окраски. В настоящее время это окраска гематоксилином и эозином на первом этапе. Затем окрашенные срезы закрываются под покровную пленку, что сохраняет их от повреждения, и подаются врачу. Происходит первичный этап диагностики – описание гистологической картины. Нередко уже на данном этапе при типичной картине можно выставить тот или иной диагноз. Обычно это касается тех случаев, когда материал не содержит опухоли, неинформативен или представлен характерным доброкачественным образованием или же стандартным патологическим процессом (например, воспалением). Однако в большинстве случаев, особенно в диагностике злокачественных процессов, требуется еще несколько этапов работы.

Таковыми являются специальные гистохимические окраски и иммуногистохимическое исследование.

В настоящее время существует множество гистохимических техник, позволяющих выявить тот или иной специфический патологический процесс. Избыточный фиброз (окраска трихромом по Массон или импрегнация серебром), отдельные болезни накопления или наличие специфических гранул в клетках (PAS), туберкулез (окраска по Циль-Нильсену) и т.д. На этом нередко заканчивается весь процесс и диагноз финализирован.

Но описанная простота диагностики лишь кажущаяся. Зачастую патоморфолог сталкивается с опухолями, не имеющими типичной гистологической картины или же не относящимися к определенной их группе. Таковыми являются мелкокруглоклеточные опухоли (лимфомы, нейробластомы, рабдомиосаркомы, нейроэндокринные карциномы и др.), веретеноклеточные опухоли (гемангиомы, шванномы, нейрофибромы, гистиоцитарные саркомы, лейомиосаркомы и т.п.), а так же различные виды аденокарцином или метастазы из невыявленного первичного очага. Прогноз у каждой из приведенных для примера опухолей различен, каждая из них имеет свой прогноз, и для каждой из них свой протокол лечения. Гистологическая картина у них может быть практически одинаковой. И для того, чтобы понять, с чем же мы имеем дело, применяется третий этап диагностики – иммуногистохимическое исследование.

Применение иммуногистохимического исследования возможно не только для постановки диагноза. Данный вид исследования применяется и для определения возможности проведения таргетной (специфической) терапии, а также для определения степени злокачественности образования. Или, в случае метастазов из невыявленного первичного очага, предположить источник метастазирования.

Стоимость и срок исследования

* Организация и оплата доставки сырого материала (не в блоках) осуществляется клиентом.

По всем возникшим вопросам Вы можете проконсультироваться у нашего медицинского администратора по телефону: 8-800-555-92-67 или написать нам в WhatsApp: +7 925 740 05 87

Источник

Что такое иммуногистохимия

Иммуногистохимия (ИГХ) – это метод локализации специфических антигенов в тканях, основанный на распознавании антигена соответствующим антителом и выявления результатов этого связывания на светооптическом уровне.

История ИГХ началась в 1940-х годах, когда Coons с соавторами разработали технику иммунофлуоресценции для выявления антигенов в замороженных срезах. Позже были разработаны и внедрены антитела, меченые не флуоресцентными красителями, а ферментами. Нанесение ферментной метки (пероксидаза хрена) на антитело, открытое Avrameas и Nakane с последующим воздействием визуализирующей системы, позволило увидеть окрашенный продукт реакции отмеченного антитела в световой микроскоп. Таким образом стало возможным идентифицировать клетки различных типов по их уникальным признакам (маркерам). Кроме того, метод позволил выявлять гормоны и рецепторы к ним, а также изучать синтетические и секреторные процессы.

Метод получил широкое распространение в диагностической патологии только в 1990-х. Taylor и Burns первыми успешно продемонстрировали метод на фиксированной в формалине заключенной в парафин ткани (т.е. на гистологических препаратах, приготовленных стандартным способом).

Существуют различные способы проведения реакции. Так, наиболее часто используют прямой метод, при котором маркированные антитела антитела связываются непосредственно с выявляемым веществом. Более чувствительным является непрямой метод, основанный на том, что немаркированные первичные антитела связываются с искомым антигеном, а затем обнаруживаются при помощи вторичных меченых антител.

Для повышения чувствительности метода начали использовать многоступенчатую визуализацию (пероксидазно-антипероксидазный, авидин-биотиновый, биотин-стрептавидиновый метод) и в итоге были разработаны высокочувствительные “полимерные” методы амплификации.

С момента внедрения метода в диагностическую практику, его применение значительно расширилось, иммуногистохимическое исследование перестало быть предметом только научных исследований. ИГХ стало существенным компонентом процесса постановки диагноза и классификации опухоли. Кроме того, с помощью ИГХ стало возможным прогнозировать дальнейшее биологическое поведение заболевания, определять возможности таргетной терапии, резистентность и чувствительность опухолевых клеток к химиотерапии.

Иммуногистохимическое исследование является очень важной частью верификации диагноза. Особенно актуальным имуногистохимическое исследование является для диагностики лимфом (в подавляющем большинстве случаев диагноз без ИГХ поставить невозможно), рака молочной железы, простаты, опухолей мягких тканей, для определения гистологической принадлежности недифференцированных опухолей и метастазов из невыясненного первичного очага.

ИГХ исследование выполняется после гистологического исследования окрашенных гематоксилином и эозином препаратов. После оценки изменений патолог интерпретирует полученную информацию и только на этом этапе назначает панель антител, применимую специально для опухолей данного гистологического типа. Обычно для постановки диагноза используется несколько антител, так как важными являются не только положительные, но и отрицательные окраски. Иногда проводится один или несколько дополнительных этапов исследования. В результате гистологическое строение опухоли сопоставляется с совокупностью полученных результатов и на основании этого выставляется окончательный диагноз.

Длительность проведения ИГХ исследования зависит от метода (вручную либо с помощью специальных аппаратов для автоматической окраски) и составляет от суток до нескольких дней, а иногда и недель. Кроме того, необходимо учитывать время, затрачиваемое патологом на интерпретацию полученных данных.

Источник