Гирудин это что такое
ГИРУДИН
ГИРУДИН (Hirudinum)— физиологический антикоагулянт прямого быстрого действия; полипептид, выделенный из тканей некоторых сосущих животных, в т. ч. медицинских пиявок. Является основным патогенетическим фактором гирудиноза (см.).
Чистый Гирудин — растворимый в воде порошок, относительно устойчивый при хранении. В его состав входят различные аминокислоты, среди них глутаминовая и аспарагиновая кислоты, глицин, лизин, цистин, серин и др. Раствор чистого Гирудина тормозит свертывание крови как в организме, так и in vitro. Протеолитические ферменты желудочно-кишечного тракта разрушают Гирудин, поэтому его вводят парентерально. При внутривенном введении антикоагулянтный эффект возникает практически моментально и продолжается в зависимости от дозы 15— 45 мин. Концентрация Гирудина в крови сравнительно быстро снижается в связи с его переходом в ткани. При внутримышечном введении действие Гирудина достигает максимума через 1 час и продолжается 4—5 час., постепенно убывая. При введении под кожу максимальный эффект наступает через 2 часа, длительность действия— 8— 10 час. Выделяется Гирудин в основном почками в неизмененном виде. При местном применении Гирудина оказывает противовоспалительное действие.
По механизму действия Гирудин является природным ингибитором тромбина: образует с ним малодиссоциирующее неактивное соединение, в результате чего тромбин теряет протеолитические свойства и фибриноген не переходит в фибрин. Под влиянием Гирудина тормозится также скорость образования тромбокиназы, тромбина, агрегация тромбоцитов. Активность Гирудина обозначают в антитромбиновых единицах. За 1 единицу принимают то количество Гирудина, к-рое блокирует активность 1 ед. тромбина.
Как гепарин (см.), Гирудин рекомендован для профилактики и лечения тромбоэмболических заболеваний. Дозу и концентрацию препарата подбирают индивидуально с учетом свертываемости крови. При тромбофлебите, язвах голени и травматической гематоме его назначают в виде мазей. В лабораторной практике Гирудин используют в виде стандартных препаратов для контроля за изменениями свертываемости крови.
Форма выпуска: герметически закрытые флаконы, содержащие стерильный порошок, который растворяют перед употреблением; производится в ГДР.
Гирудин это что такое
Прямые ингибиторы тромбина в терапии острых коронарных синдромов
О.Ю. Кудряшова
Кафедра кардиологии и общей терапии УНЦ МЦ Президента РФ
Центральную роль в патогенезе острого инфаркта миокарда, нестабильной стенокардии и реокклюзии после чрескожной транслюминальной коронарной ангиопластики (ЧТКА) играет коронарный тромбоз.
В последние годы был создан новый класс прямых антикоагулянтов, класс прямых (независимых от антитромбина III, селективных, специфических) ингибиторов тромбина, прототипом для которых послужил нативный гирудин. С лечебной целью пиявки (Hirudo medicinalis) использовались ещё в Древней Греции, однако антикоагулянтное действие слюны пиявок впервые было описано J.Haycraft в 1884 году. В 1955 году F.Markwardt удалось выделить в чистом виде вещество, названное “гирудин”, а в 80-е годы после определения его химической структуры стало возможным промышленное производство этого препарата в культуре дрожжей ДНК-рекомбинантным методом. Рекомбинантный десульфатогирудин (r-гирудин CGP 39 393) идентичен нативному и отличается только отсутствием сульфогруппы у тирозина в положении 63.
Дальнейшие исследования, базировавшиеся на изучении структуры гирудина, привели к появлению семейства гирудино-подобных пептидов (гиругенов и гирулинов). Синтетическим путём были получены аргатробан, D-фенилаланин-L-пролин-L-аргинин хлорметилкетон (PPACK) и производные бороаргинина.
В противоположность гепарину антитромботическое действие прямых ингибиторов тромбина не зависит от присутствия в плазме крови антитромбина III; фактор 4 тромбоцитов и гепариназа печени не изменяют их активности; они не связываются с протеинами плазмы, предотвращают индуцированную тромбином активацию тромбоцитов, эффективно инактивируют тромбин, связанный с фибриновым тромбом, т.е. оказывают более избирательное действие на тромбообразование.
Целью настоящего обзора является представление данных о целесообразности использовании этих препаратов при лечении острых коронарных синдромов.
В многоцентровом ангиографическом рандомизированном исследовании, (Topol E. и колл.) на 166 пациентах с нестабильной стенокардией и инфарктом миокарда без Q (ангинозная боль, наличие характерных изменений ЭКГ в покое, обнаружение тромба при КАГ), рекомбинантный гирудин достоверно более эффективно, чем гепарин способствует растворению тромба и предотвращает тромбообразование в коронарных артериях (КАГ проводилась при включении пациентов в исследование, через 72 и через 120 часов от начала инфузии антикоагулянта; анализировались такие параметры зоны стеноза, как площадь поперечного сечения сосуда, минимальная площадь поперечного сечения, минимальный диаметр просвета и площадь стеноза). Увеличение уровня перфузии по TIMI на 5-е сутки терапии отмечалось у 25 % пациентов в группе гирудина и у 19 % пациентов в группе гепарина. В группе пациентов, получавших гирудин, не было зарегистрировано ни одного случая «реактивации» нестабильной стенокардии в течение 12-24 часов после прекращения инфузии препарита. Инфаркт миокарда и дестабилизация стенокардии наблюдались недостоверно чаще у пациентов, которым проводилась гепаринотерапия. 70 % пациентов в группе гирудина имели стабильные показатели АЧТВ (колебания в пределах 40 секунд) в течение всего периода инфузии, в то время, как в группе гепарина такие показатели наблюдались только у 16 % пациентов (p
Payo A. и колл. у 153 пациентах с нестабильной стенокардией, показали, что r-гирудин (инфузия в дозах 0,1-0,3 мг/кг/час) в отличие от гепарина вызывает дозозависимое снижение уровня фибринопептида А в плазме. Если уровень фибринопептида А в течение 24 часов не превышал 5 нг/мл, то наблюдалалось достоверное улучшение ангиографических параметров по данным повторных КАГ.
Xiao и колл. у 7 пациентах с нестабильной стенокардией показали, что r-гирудин в отличии от гепарина, снижает экспрессию Р-селектина и снижает активацию GP IIb/IIIa рецепторов тромбоцитов, что сопровождается уменьшением тромбин-индуцированной агрегации.
В двойном-слепом рандомизированном гепарин-контролируемом исследовании HELVETICA, у 1141 пациента, изучалась эффективность рекомбинантного гирудина и гепарина после ЧТКА. Частота осложнений ЧТКА была достоверно меньшей при применении гирудина (Табл.1).
Таблица 1. Результаты исследования HELVETICA. [18]
(24 часа), далее п/к: 40мг 2р/д
Инфаркт миокарда, летальный исход, повторная ЧТКА (%)
Клинически значимые геморрагические осложнения (%)
Terres W. и колл., показали, что r-гирудин обладает способностью предотвращать повреждение клеток миокарда после ЧТКА у пациентов с нестабильной стенокардией; как маркёр повреждения миокарда использовался тропонин Т, его уровень в крови коррелирует с прогнозом у пациентов с нестабильной стенокардией (Табл. 2).
Таблица 2. Результаты исследования Terres W. и колл. [19]
Количество пациентов в группе
тропонина Т > 0.2 нг/л
Инфаркт миокарда, окклюзия коронарной артерии, смерть
Результаты, полученные в пилотных исследованиях, являются предварительными и не позволяют сделать вывод о преобладающей эффективности того или иного препарата, демонстрируя только некоторые тенденции; чтобы проанализировать сравнительную эффективность антикоагулянтов нового класса и гепарина, были проведены многоцентровые исследования на большом контингенте пациентов, исследования III фазы.
Таблица 3. Частота развития геморрагических инсультов в GUSTO IIA
активатор плазминогена
В пилотном ангиографическом исследовании, у 45 пациентов с острым инфарктом миокарда, леченных стрептокиназой, проводилась оценка эффективность гирулога (инфузия – 0,5 мг/кг/час в течение 12 часов, далее – 0,1 мг/кг/час) и гепарина (1000 ЕД/час с последующим титрованием дозы под контролем АЧТВ). Ранняя (через 90 минут от начала терапии) реперфузия в связанной с инфарктом коронарной артерии по данным КАГ наблюдалась у 77% пациентов, которым проводилась терапия гирулогом, и только у 47% пациентов в группе гепарина (p 40% из группы гепарина (p
В исследовании HERO-1 48% пациентов, получавших гирулог (бивалирудин) после проведения тромболизиса стрептокиназой, к 90-й минуте имели 3-й уровень перфузии по TIMI в сравнении с 35% больных, получавших гепарин (р
Таблица 4. Результаты сравнительного исследования безопасности гирулога и гепарина [24]
Виды геморрагических осложнений и частота их развития (%)
Геморрагии в зоне инструментального вмешательства
Кровотечения, потребовавшие переливания эритроцитарной массы
Достоверное снижение уровня смертности, частоты развития острой окклюзии и инфаркта миокарда наблюдалось только в подгруппе пациентов с постинфарктной стенокардией (n-704), получавших гирулог (3,2% и 9,1% соответственно, р
PPACK и аргатробан
Хорошая переносимость и дозозависимое влияние на параметры коагуляции (АЧТВ и тромбиновое время) были показаны для аргатробана в исследовании на здоровых добровольцах. Препарат вводился внутривенно, нормализация параметров коагуляции регистрировалась через 1 час после введения. В исследовании не было выявлено увеличения времени кровотечения.
Gold и колл. на 43 пациентах изучили эффективность аргатробана при внутривенном введении у больных нестабильной стенокардией. Во время инфузии препарата наблюдалось дозозависимое увеличение АЧТВ, уменьшение уровня фибринопептида А и отсутствие ангинозных болей, но прекращение инфузии сопровождалось «реактивацией» стенокардии у 23 % пациентов, чаще наступавшей у пациентов, у которых применяли более высокие дозы аргатробана. Прекращение инфузии аргатробана сопровождалось увеличением уровней комплекса тромбин-антитромбин и фибринопептида А в крови. Высказано предположение, что феномен «реактивации» стенокардии обусловлен повышением генерации тромбина после прекращения терапии аргатробаном.
В мультицентровом рандомизированном исследовании MINT (n-125), проведённом у пациентов с острым инфарктом миокарда, изучался аргатробан в сравнении с гепарином как дополнение к тромболитической терапии тканевым активатором плазминогена. Достоверные результаты были получены только у пациентов, доставленных в стационар более чем через 3 часа от начала инфаркта миокарда: 3 уровень перфузии по TIMI наблюдался достоверно чаще в группе аргатробана в сравнении с гепарином (57,1% и 20,0% соответственно, р=0,03). Тяжёлые кровотечения наблюдались в 10,0% случаев в группе гепарина, в 4,3% случаев в группе больных, получавших аргатробан в высокой дозе и в 2,6% в группе больных, получавших аргатробан в низкой дозе.
Другие ингибиторы тромбина
Открыто множество различных субстанций с антитромбиновой активностью, высокая токсичность которых не позволяет применить их в клинической практике, к ним относят: производные бензамидина и бороаргинина (DuP 714).
Высокой антитромбиновой активностью как in vivo так и in vitro обладают аптамеры тромбина, они блокируют субстратный центр молекулы тромбина. Такие особенности фармакокинетики этой группы препаратов, как быстрое начало действия и короткий период полувыведения, имеют некоторые преимущества и, возможно, в будущем позволят применять эти препараты в определённых ургентных клинических ситуациях.
Результаты, полученные в исследованиях III фазы для прототипа прямых ингибиторов тромбина – гирудина, некорректно экстраполировать на весь класс антитромбинов, поскольку фармакокинетические различия препаратов принципиально отражаются на их механизме действия: так гирулог, в отличие от гирудина, обратимо связывается с тромбином, при этом последний сохраняет способность к взаимодействию с тромбомодулином, к которому имеет большее сродство, в результате не нарушается процесс активации протеина С. Более широкий терапевтический интервал гирулога позволяет увеличить дозу без сопутствующего повышения риска кровотечений и исключает необходимость лабораторного мониторирования терапии. Однако многоцентровые исследования III фазы гирулога ещё не проведены, что делает все выводы об этом препарате преждевременными.
Таким образом, появившиеся в последние годы препараты нового класса прямых антикоагулянтов, прямые ингибиторы тромбина (гирудин, гирулог), несомненно, обладают некоторыми преимуществами в сравнении с гепарином и гепариноидами, однако вопреки ожиданиям не оказывают существенного влияния на результаты тромболизиса и прогноз у пациентов с острыми коронарными синдромами в сравнении с гепарином. Значимое снижение частоты неблагоприятных исходов при терапии прямыми ингибиторами тромбина наблюдается только в раннюю фазу и практически не распространяется на период после прекращения введения препаратов, что является поводом к обсуждению пролонгированного назначения антитромбинов и разработке пероральных форм препаратов данного класса. Однако высокая стоимость прямых ингибиторов тромбина существенно ограничивает их применение в клинике.
Выстраиваем защиту
Вы обращали внимание, что некоторые люди могут спокойно сидеть на сквозняке, гулять в мороз в легкой куртке, купаться в холодной реке, общаться с простуженными друзьями, и при этом – не заболевают? В то время как другие берегутся изо всех сил, носят в период эпидемий марлевые маски, кутаются в теплые свитеры и шерстяные носки, и всё равно не вылезают из простуд? С чем это связано? Все дело в иммунитете!
Наш иммунитет – это основной механизм защиты организма от вирусов и бактерий. Развитие иммунной системы в процессе эволюции и обусловило саму возможность существования человека. Иммунитет бывает врожденный и адаптивный (приобретенный).
Врожденный иммунитет — это способность организма распознавать и обезвреживать различные бактерии и вирусы по общим признакам. Как понятно из названия, это базовое свойство организма, которое он получает при рождении. Адаптивный иммунитет распознает более специфические, индивидуальные патогены, он формируется в процессе столкновения с ними, после болезней или прививок.
Признаки иммунного сбоя
Иммунная система формируется у человека еще в утробе матери, и немало зависит от наследственности. Но и весьма значительную роль в работе иммунитета играет образ жизни. И если с наследственностью мы сделать ничего не можем, то укрепить иммунитет, выполняя определенные правила, — в наших силах!
Как укрепить иммунитет?
Закаливание
Закаливание – это, по сути, тренировка иммунной системы. Главный принцип закаливания: умеренность, постепенность и регулярность.
Начните с малого: больше гуляйте, чаще проветривайте квартиру, ходите по дому босиком, обтирайтесь смоченными прохладной водой губкой или полотенцем, умывайтесь прохладной водой. Потом можно переходить к более серьезным процедурам: обливанию холодной водой, контрастному душу. Контрастный душ, кстати, очень полезен и для тренировки сердечно-сосудистой системы, улучшения состояния кожи, профилактики целлюлита. Только не забывайте про осторожность и постепенность! Если у вас уже есть проблемы с сердечно-сосудистой системой, предварительно проконсультируйтесь с вашим кардиологом.
Очень важна регулярность закаливающих процедур, отсутствие между ними больших перерывов.
Начинать закаливающие процедуры можно только, если вы полностью здоровы. В идеале – после консультации с врачом.
Питание
Для укрепления организма необходимо сбалансированное питание, богатое витаминами и микроэлементами. Для того чтобы вы получали все необходимые вещества и микроэлементы, питание должно быть максимально разнообразным. Ежедневно в рационе должны присутствовать все основные группы продуктов: молочные, крахмалистые, овощи, фрукты, источники сложных углеводов, белка и жиров. Сложные углеводы содержатся в крупах, макаронах, картофеле, хлебе с отрубями и в бездрожжевых хлебцах из цельного зерна. Они долго усваиваются, в отличие от простых углеводов, которые содержатся в сахаре, печенье, тортах и прочих сладостях. Также человеку необходимы неперевариваемые углеводы – клетчатка или пищевые волокна. Они создают ощущение сытости, и, кроме этого, полезны для пищеварения. Такие углеводы содержатся в овсянке, в хлебе из муки грубого помола.
Помимо этого нашему организму необходимы жиры, поскольку они помогают усваивать витамины А и Е. Если в организме недостаточное количество жиров, хуже выглядит кожа, страдает печень, перестают вырабатываться половые гормоны. Жиры бывают насыщенными и ненасыщенными. Последние лучше усваиваются, соответственно, они более полезны. Их хорошо получать из жирных сортов рыбы, авокадо, миндаля, оливкового масла. Разумеется, употребление продуктов, содержащих скрытые неполезные жиры, такие, как майонез, колбаса, торты, стоит ограничивать.
Ешьте как можно больше овощей и фруктов, желательно в термически необработанном виде для большей сохранности витаминов.
Витамины и пробиотики
Многочисленные исследования показывают, что в России, да и в других странах тоже, подавляющее большинство людей страдает от гиповитаминоза – нехватки витаминов. Как известно, витамины не образуются в организме человека, за исключением витамина D и витаминов, синтезируемых бактериями кишечника, поэтому должны постоянно присутствовать в составе пищи. Но даже при самом рациональном питании (а будем откровенны – у большинства из нас питание далеко не идеально сбалансированное) рацион человека сегодня «недоукомплектован» витаминами на 20–30%. Усвояемость витаминов из «искусственных» препаратов зачастую выше, чем из обычной еды.
Соответственно, необходимо регулярно принимать поливитаминные препараты. В период болезней, стрессов, депрессий, повышенной нагрузки, беременности, при курении и злоупотреблении алкоголем, приеме антибиотиков потребность в витаминах возрастает. Продолжительность приема поливитаминов определяется врачом, и обычно составляет 1–3 месяца, курс желательно повторять 2–4 раза в год. Витамины лучше усваиваются, если суточную дозу разделить на несколько приемов, основной прием препаратов лучше назначить на первую половину дня, так как вечером и ночью обмен веществ в организме замедляется. Поскольку человек всегда получал витамины из пищи, лучше принимать витаминные препараты во время еды, так они усваиваются полнее.
Помимо витаминов, для укрепления иммунной системы важны пробиотики. Пробиотики – это лекарственные препараты или биологически активные добавки к пище, которые содержат в составе живые микроорганизмы, являющиеся представителями нормальной микрофлоры человека. Они призваны восстановить нарушенный баланс микроорганизмов, населяющих различные слизистые человека, и поэтому применяются для лечения и профилактики иммунодефицита, дисбактериозов и связанных с ними заболеваний.
Пробиотики стимулируют иммунную систему на всех уровнях, что доказано многочисленными клиническими исследованиями. Пробиотики и витамины не стоит назначать себе самостоятельно, лучше, если это сделает врач.
Режим и физическая активность
Для нормальной работы всего организма и хорошего самочувствия человека очень важен режим.
Старайтесь вставать и ложиться в одно и то же время, высыпаться. Больше отдыхать, гулять на свежем воздухе. Необходимо заниматься спортом, делать зарядку.
Регулярная физическая активность благотворно влияет на иммунитет. Во время активной физической нагрузки повышается общий тонус организма, улучшается настроение, что способствует большей активности и приливу энергии, кровь обогащается кислородом, улучшаются сон и аппетит. Физические нагрузки помогают избавиться от стресса, в организме вырабатываются эндорфины («гормоны счастья»).
И обязательно гуляйте на свежем воздухе. Если позволяет погода, постарайтесь проводить на улице не менее часа в день. В идеале – в светлое время суток, ведь солнце необходимо не только для выработки витамина D, без солнечного света понижается уровень серотонина (еще одного «гормона счастья») в крови, который отвечает за наше хорошее настроение. Осенью и зимой проблема нехватки солнечного света особенно актуальна – мы встаем затемно, выходим с работы уже после захода солнца. Пользуйтесь любой возможностью поймать дневной свет: гуляйте во время обеденного перерыва, обязательно планируйте прогулки на выходных.
Отказ от вредных привычек
Вредные привычки – курение, алкоголь, злоупотребление лекарственными и наркотическими препаратами – очень сильно ослабляют иммунную систему организма, ухудшают функционирование многих органов, губят сосуды, мозг, легкие, повышают риск развития заболеваний. По сути, если вы постоянно себя травите курением, алкоголем и пр., сложно ожидать от организма хорошего состояния. Алкоголь и никотин угнетают иммунитет, в результате чего он перестает выполнять свои защитные функции. Кстати, ослаблять иммунитет могут и многие лекарственные препараты, поэтому, во-первых, не стоит бездумно принимать таблетки без назначения врача, во-вторых, если вы принимаете лекарства, усильте меры по укреплению иммунной системы.
Позитивный жизненный настрой
Между физической и эмоциональной составляющими у людей есть теснейшая взаимосвязь. Если человеку жизнь не приносит радость и удовольствие, то запускаются биологические механизмы самоуничтожения. Будьте позитивны, радуйтесь каждому дню — для этого всегда есть повод. Умение позитивно воспринимать любую действительность — это без преувеличения залог здоровья и долголетия.
Надеемся, что наши советы помогут вам стать более здоровыми, и предстоящий осеннее-зимний сезон принесет вам только радость, а не болезни!
Гирудин это что такое
Современная медицина все большее внимание уделяет созданию новых высокоэффективных и безопасных лекарственных средств. В большинстве своем применение препаратов, представленных как продуктами химического синтеза, так и животного или растительного происхождения, сопровождается побочными эффектами, что часто ограничивает их клиническое применение. Актуальной остается проблема поиска новых потенциальных лекарственных средств, в том числе и на основе природного сырья. При этом важным представляется поиск средств, проявляющих многоплановое действие (в том числе противовоспалительное, ранозаживляющее, противоожоговое, антигеморрагическое, противосвертывающее) при накожном применении для терапии повреждений в быту, при чрезвычайных ситуациях, в спортивной медицине и т.д.
Медицинская пиявка является источником уникальных соединений, синтезируемых только этим видом животных. Прежде всего это литические соединения, обеспечивающие разрушение тканей, влияющие на проницаемость межклеточного матрикса дермы (гирудин [1], простагландины [2], пептидаза – дестабилазный комплекс [3, 4], коллагеназа, антигемостатики – препятствующие развитию механизмов свертывания крови (калин, апираза, антагонист PAF, ингибитор Ха фактора, гирудин), блокаторы защитных реакций организма (бделлины, гирустазин, ингибитор триптазы, ингибитор карбоксипептидазы А, эглины), вспомогательные вещества [1], биологически активные компоненты, проникающие через гемато-энцефалический барьер [5]. По мнению ряда исследователей, гирудин и подобные ему препараты являются одними из наиболее перспективных антикоагулянтов и рассматриваются как альтернатива гепарину [6]. Интерес к уникальным свойствам фермента подтверждается растущим числом публикаций по изучению его эффективности при различных тромботических состояниях, включая тромбозы коронарных, мозговых и др. артерий [2].
До настоящего времени в качестве лекарственных форм препаратов на основе медицинской пиявки используют жидкие (в виде растворов для внутривенных инъекций) или твердые лекарственные формы (в виде таблеток или капсул).
Цель исследования. Определение перспективности разработки препаратов на основе экстракта пиявки Hirudo medicinalis при накожном применении.
Материалы и методы исследования
Все исследования выполнены в соответствии с методическими рекомендациями по доклиническому изучению лекарственных средств [7].
Эксперименты проведены на 100 мышах линий Ваlb/c массой 20,2±0,4 г белых неинбредных, 240 белых неинбредных крысах массой 210±4 г и 20 кроликах породы Шиншилла массой 3000±10 г, самцах и самках. Исследования проводили в соответствии с правилами качественной лабораторной практики при проведении доклинических исследований в РФ [8], а также выполнены с соблюдением национальных и международных требований по содержанию и гуманному обращению с животными [9, 10]. Объектами исследования являлись экстракт медицинской пиявки (ЭМП), фармакопейная статья МЗ РФ 42-2384-94), «Гирулюкс, 1 % мазь для наружного применения» и «Гирулюкс, 1 % гель для наружного применения». Согласно проведенному ОКК ЗАО «МЦМП» анализу испытанные образцы соответствуют разработанной ФСП. Субстанцию ЭМП стандартизировали по антитромбиновой и антикоагулянтной активности [11].
В работе дозы исследуемых мази Гирулюкс 1 % и геля Гирулюкс 1 %, пересчитанные с учетом межвидового пересчета доз [8, с.22], с человека (4г/70кг=57,1мг/кг) на мышь (1:11), крысу (1:7) и кролика (1:3,2) составили для мышей 630мг/кг, для крыс 400мг/кг и для кроликов 183мг/кг. ЭМП использовали в тех же дозах в виде 1 % раствора на 0,9 % NaXl. Препараты сравнения – Диклофенак гель 1 %, ОАО «Биохимик», Гепариновая мазь, ОАО «НИЖФАРМ», Heparin-Akhrigel 1000; Акрихин ХФК ОАО – применялись в тех же дозах (мл/кг), что и исследуемые потенциальные лекарственные средства на килограмм массы тела для аналогичных экспериментальных животных, мазь диклофенака Ортофен, мазь 2 %; ЗАО «Вертекс» – в 2 раза меньшем объеме. Исследованные образцы наносили на животных за несколько раз.
Противовоспалительную активность оценивали на модели «формалинового» отека лапы у мышей при субплантарном введении в заднюю лапу 0,1 мл 2 % водного раствора формалина. Подопытным животным наносили исследованные образцы на подошву лапы с легким растиранием ежедневно в течение 10 дней, контрольной группе – изотонический раствор натрия хлорида. Выраженность отека оценивали, измеряя толщину лапки до и через 4 часа после введения формалина. Оценку противовоспалительной активности проводили также на модели «фетровой» гранулемы у крыс. Хроническое пролиферативное воспаление вызывали имплантацией под кожу медиальной части спины простерилизованных кусочков фетра массой 40±2 мг. Ежедневно на выстриженный участок с легким растиранием наносили исследуемые образцы. На 8-е сутки после операции кусочки фетра с образовавшейся вокруг них грануляционной тканью извлекали, взвешивали и высушивали до постоянной массы. Рассчитывали пролиферативную и экссудативную реакцию в %.
Оценку терапевтического действия при геморрагических повреждениях осуществляли на белых неинбредных крысах. У подопытных животных удаляли волосяной покров на части кожи спины. Геморагические повреждения мягких тканей с использованием местной анестезии (лидокаин) вызывали путем нанесения стандартного тупого удара фиксированной силы. Крысам ежедневно в течение 6 дней накожно с легким втиранием наносили исследованные образцы до полного исчезновения гематом.
Ранозаживляющее действие изучали на белых нелинейных крысах. Предварительно у подопытных животных удалили волосяной покров на части кожи спины площадью 3х3 см2. Послойные кожные раны наносили с помощью трафарета площадью 225 мм² с использованием местной анестезии (лидокаин). На кожу подопытных животных ежедневно наносили исследованные образцы до полного заживления.
Оценку противосвертывающего действия проводили на кроликах при нанесении в течение 10 дней подопытным животным с легким втиранием исследуемых образцов на участок кожи с удаленным волосяным покровом площадью 4х4 см2. До эксперимента и через 10 дней из краевой вены уха забирали кровь для регистрации времени свертывания крови по данным анализа гемокоагуляции с помощью АГКМ 1-01.
Статистическую обработку данных проводили с помощью пакета программы ПО Microsoft Office EXCEL 2010 и STATISTICA Version 10. Наличие нормального распределения данных проверяли с использованием критерия Колмогорова – Смирнова. Параметры нормальных распределений признаков в выборках описывали в формате М±m (среднее значение ± стандартная ошибка среднего). Статистическую достоверность различий результатов исследований между группами проверяли по t-критерию Стьюдента.
Результаты исследования и их обсуждение
При субплантарном введении 0,1 мл 2 % раствора формалина у подопытных мышей развивается выраженный отек лапы, о чем свидетельствует достоверное увеличение ее объема. Через 4 часа после введения формалина объем лапы у подопытных животных контрольной группы увеличился на 72,1±2,8 %. При накожном нанесении ЭМП отмечается уменьшение выраженности индуцированного формалином отека лапы у мышей до 52,28±4,60 %, что в 1,38 раза (р